外泌體源自于細胞質膜的內吞作用。細胞質膜內陷形成早期內體（Early Endosome），而早期內體質膜內陷出芽形成多泡體，多泡體外膜與細胞膜融合后，向細胞外釋放出外泌體。

在外泌體形成過程中，供體細胞的胞質內容物會被裝載到外泌體中，一起被供體細胞通過胞吐作用分泌到細胞外，進而通過受體-配體相互作用的方式傳遞給受體細胞。